Risk factors related to seropositivity for Leptospira spp. in horses in the Serra Catarinense region / Fatores de risco relacionados a soropositividade para Leptospira spp. em equinos na região da Serra Catarinense

ABSTRACT: Leptospirosis is a zoonotic infectious disease caused by the bacterium Leptospira spp. The consequences of infection in horses are unclear, and the serogroups involved vary depending on the region. This study aimed to evaluate the seropositivity of unvaccinated horses in the Serra Catarinense region and the possible risk factors associated with the infection. We used 207 horses from 26 properties, with no clinical history of infection and unvaccinated for leptospirosis. We submitted serum samples to the microscopic agglutination serum (SAM) to obtain the main reference serogroups. We considered animals with titre ≥100 as infected. The results of the serology revealed seropositivity in 45.4% (94/207) of the animals studied. The most frequent antibodies reportedwere those against the serogroups Australis 16.9% (35/207), Ichterhaemorrhagiae 14.4% (30/207), and Grippotyphosa 5.31% (11/207). Among the primary risk factors associated with the infection we reported extensive rearing system (OR = 1.27; P<0.05) and the presence of other animal species such as cattle (OR = 3.85; P<0.01) and capybaras (OR = 2.07; P=0.06). The findings presented in this study showed that leptospirosis is endemic in horses in the Serra Catarinense region, and revealed the need for emergency surveillance and control measures specific to this important zoonosis.

RESUMO: A leptospirose é uma doença infecciosa zoonótica, causada pela bactéria Leptospira spp. Em equinos, as consequências da infecção não são claras e os sorogrupos envolvidos variam dependendo da região. Sendo assim, este trabalho objetivou avaliar a soropositividade de Leptospira spp. em equinos não vacinados na região serrana Catarinense e estimar os possíveis fatores de risco associados à infecção. Para tal, foram estudados 207 equinos, de 26 propriedades, sem histórico clínico da infecção e não vacinados para leptospirose. As amostras de soro foram submetidas ao ensaio de soro aglutinação microscópica (SAM) para os principais sorogrupos de referência. Animais com título ≥100 foram considerados reagentes. Os resultados da sorologia revelaram uma soropositividade de 45,4% (94/207) para os animais estudados. Com maior frequência foram observados anticorpos contra os sorogrupos Australis 16,9% (35/207), Icterohaemorrhagiae 14,4% (30/207), e Grippotyphosa 5,31% (11/207). Dentre os principais fatores de risco associados à infecção observados, foram o sistema de criação extensivo (OR=1,27; P<0,05) e a presença de outras espécies animais como bovinos (OR=3,85; P<0,01) e capivaras (OR=2,07; P=0,06). Os achados apresentados neste estudo mostraram que a leptospirose em equinos é endêmica na região da serra Catarinense, e revelam a necessidade de medidas emergenciais de vigilância e controle específicas para esta importante zoonose.

Neospora spp. antibodies in horses from two geographical regions of the state of Santa Catarina, Brazil / Anticorpos contra Neospora spp. em equinos de duas regiões geográficas do Estado de Santa Catarina, Brasil

The aims of this study were to determine occurrences of Neospora spp. IgG antibodies in horses from two geographical regions of the state of Santa Catarina, southern Brazil, and identify risk factors for infection. Analyses were performed on 615 samples using the immunofluorescent antibody test (IFAT ≥ 1:50). Out of the 615 samples, 25 (4.1%) were positive for Neospora spp. The titers for Neospora spp. were distributed as follows: 1:50 (13), 1:100 (eight), 1:200 (three) and 1:400 (one). Out of the 311 samples taken in the mountain region, eight were positive (2.6%). Among the samples from the coastal region (304), 17 had Neospora spp. antibodies, thus indicating occurrence of 5.6%. Although no statistically significant difference was observed (P = 0.06704), the prevalence among animals of the coast was 2.2 times higher than that of the mountain region. Contact with dogs and/or cattle (P = 0.007596) were identified as risk factor for Neospora spp. infection.

O presente estudo objetivou determinar a ocorrência de anticorpos anti-Neospora spp. em equinos das regiões serrana e litorânea de Santa Catarina e identificar possíveis fatores de risco para a infecção. Foram analisadas 615 amostras por meio da reação de imunofluorescência indireta (RIFI ≥1:50). Das 615 amostras, 25 (4,1%) foram positivas para Neospora spp. A recíproca dos títulos de anticorpos anti-Neospora spp. nos equinos foi assim distribuída: 1:50 (13), 1:100 (oito), 1:200 (três) e 1:400 (um). Das 311 amostras da Serra Catarinense, oito foram positivas (2,6%). Das amostras da Região Litorânea (304), 17 apresentaram anticorpos anti-Neospora spp., indicando uma prevalência de 5,6%. Não foi observada diferença estatística significante (P=0,06704) entre as soroprevalências para Neospora spp. em equinos das diferentes regiões, porém os animais do litoral de Santa Catarina apresentaram prevalência 2,2 vezes maior que aqueles da região serrana. O contato dos equinos com cães e/ou bovinos (P=0,007596) foi identificado como fator de risco para infecção por Neospora spp.

Vacuum-cooled liquid nitrogen increases the developmental ability of vitrified-warmed bovine oocytes

The objective of this study was to determine the effects of vacuum-cooled liquid nitrogen on the development of vitrified immature (germinal vesicle stage; GV) and mature (metaphase II; MII) bovine oocytes after re-warming. Liquid nitrogen was exposed to either atmospheric pressure or to a vacuum (300mm Hg for 45sec); the latter decreased the temperature of the liquid nitrogen to -200°C. Partially denuded oocytes were vitrified either just after selection (GV) or after 22 hours of in vitro maturation (MII) in TCM 199 medium + 10 percent of estrous mare serum. For vitrification, oocytes were firstly exposed to an intermediate solution (10 percent EG + 10 percent DMSO) for 30sec, followed by the vitrification solution (20 percent EG + 20 percent DMSO + 0.5M sucrose) for 20sec. Groups of three or four oocytes were loaded into an open-pulled-straw and directly plunged into liquid nitrogen. Oocytes were subsequently re-warmed by exposure to air (25°C) for 4sec, followed by 5 min exposure to decreasing concentrations (0.3 and 0.15M) of sucrose. Fertilization (Day 0) was done with 2 x 106 spermatozoa mL-1 (selected by a swim-up procedure) and incubated for 18 to 22 hours. Presumptive zygotes were cultured at 39°C in four-well dishes with SOFaaci medium, under 5 percent CO2 and saturated humidity. Cleavage (Day 2) and blastocyst rates (Day 8) were 33.9 and 4.2 percent, respectively, for GV stage oocytes at atmospheric pressure, 41.2 and 8.8 percent for GV oocytes under vacuum, 43.5 and 6.7 percent for MII oocytes at atmospheric pressure, and 53.6 and 10.6 percent for MII oocytes under vacuum. In conclusion, vacuum-cooled liquid nitrogen improved developmental rates of vitrified-thawed bovine oocytes.

O objetivo deste estudo foi determinar o efeito do nitrogênio liquido super resfriado por vácuo no desenvolvimento, após reaquecimento, de oócitos bovinos vitrificados imaturos ou maturados. O nitrogênio líquido foi mantido em atmosfera normal ou submetido ao vácuo (300mm Hg por 45s) este último reduzindo a temperatura do nitrogênio para -200°C. Oócitos parcialmente desnudos foram vitrificados logo após a seleção (estádio de vesícula germinativa; VG), ou após 22 horas de maturação (metáfase II; MII) em meio TCM 199 + 10 por cento de soro de égua em estro. Para a vitrificação, os oócitos foram inicialmente expostos a uma solução intermediária (10 por cento EG + 10 por cento DMSO) por 30s e a seguir a uma solução de vitrificação (20 por cento EG + 20 por cento DMSO + 0,5M sacarose) por 20s. Grupos de 3 ou 4 oócitos foram envasados em palhetas estiradas e abertas e mergulhados no nitrogênio líquido. Os oócitos foram então reaquecidos por exposição ao ar (25°C) por 4s, seguido de exposição a concentrações decrescentes de sacarose (0,3 e 0,15M - 5 minutos cada). A fecundação (dia 0) foi realizada com 2 x 106 espermatozóides mL-1 (selecionados por "swim-up") e incubação por 18 a 22 horas. Os presumíveis zigotos foram cultivados a 39°C, em placas de quatro poços, com meio SOFaaci, com 5 por cento de CO2 e umidade saturada. As taxas de clivagem (Dia 2) e de blastocistos (Dia 8) obtidas foram de 33,9 e de 4,2 por cento, respectivamente, para oócitos no estágio de VG / pressão normal, de 41,2 e 8,8 por cento para oócitos VG / vácuo, 43,5 e 6,7 por cento para oócitos MII / pressão normal e de de 53,6 e 10,6 por cento para oócitos MII / vácuo. Conclui-se que o emprego de nitrogênio líquido super resfriado pelo vácuo melhora as taxas de desenvolvimento de oócitos bovinos após a vitrificação.